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兩天5篇《Nature》!Incucyte殺瘋了……

2024-11-20 07:46:27

長時程活細胞成像系統Incucyte®因其簡便的實驗設定和分析流程、以及廣泛的應用方向,深受使用者喜愛。在體外細胞水平的實驗中發揮著重要作用。引用其資料的CNS正刊上論文數量眾多,目前使用到Incucyte®發表的CNS正刊總數已經達到約200篇,往期連結如下:

最近的2024年10月,利用Incucyte® 發CNS正刊的數量又達到了新高度,兩天5篇NATURE!

他們又是如何應用Incucyte® 的呢?

NATURE

免疫細胞和靶細胞共培養[1]

中毒性表皮壞死鬆解症(TEN)是一種由常見藥物誘導的致命皮膚反應,已成為一個新興的公共衛生問題。TEN患者會因角質形成細胞死亡,而出現嚴重和突然的表皮脫離。透過蛋白質組學分析,發現TEN患者免疫細胞和角質形成細胞區室中I型和II型干擾素的顯著富集。Incucyte® 體外實驗發現,使用JAK抑制劑託法替尼( tofacitinib)降低了角質形成細胞的細胞毒性。體內口服給藥改善了兩種不同的TEN小鼠模型的臨床和組織學疾病嚴重程度。

圖1. Incucyte® 測試:自體共培養模型中,活化的外周血單核細胞(PBMC)在5小時內有效殺死角質形成細胞,並且這種作用被託法替尼以劑量依賴性方式抑制。每隔兩個小時測試一次,對死亡的角質形成細胞進行統計。

Incucyte® 有多個板位,可以滿足多個實驗組的高通量測定。

NATURE

細胞凋亡[2]

三陰性乳腺癌 (TNBC)因其高度侵襲性和高複發率而令人談虎色變,迫切需要開發更有效的治療方法。本文發現,AKT抑制劑與組蛋白甲基轉移酶EZH2抑制劑的藥物具有協同作用,並在體內多個TNBC模型中促進持續的腫瘤消退,明確了其藥理作用。Incucyte® 被用於體外檢測藥物對腫瘤細胞系的殺傷作用。

圖2. Incucyte® 測試結果:NucLight Rapid Red試劑 (Sartorius,4717)標記細胞,用Cytotox Green (Sartorius,4633)監測細胞毒性。每2小時採集一次影象,持續5天。使用Incucyte®軟體透過量化overlay的NucLight-red和Cytotox-green雙陽性細胞數(即死亡的細胞數)除以 NucLight-red 陽性細胞的總數來確定細胞毒性細胞的百分比。

Incucyte®有完善的活細胞試劑,並提供相應的protocol,以及overlay分析等軟體功能。

NATURE

劃痕實驗[3]

人類產前皮膚由先天免疫細胞(包括巨噬細胞)組成,但這些細胞是否僅在免疫方面發揮作用,還是在形態發生中具有其他功能,尚不清楚。本文彙編了一份全面的產前人類皮膚多組學參考圖譜,結合單細胞和空間轉錄組學資料,表徵了皮膚的微解剖組織生態位。該圖譜揭示了非免疫細胞和免疫細胞之間的串擾是毛囊形成的基礎,與無疤痕傷口癒合有關,對皮膚血管生成至關重要。

圖3. Incucyte® 劃痕測試:成纖維細胞與巨噬細胞共培養可以增加傷口癒合。

Incucyte® 有專門的工具可以方便的創造一致的劃痕。

NATURE

兩種細胞的競爭[4]

晚期尿路上皮癌(UC)是一種經常致命的疾病,具有顯著的遺傳異質性。化療會誘導數百個晚期亞克隆突變的爆發。透過基因組計算工具觀察到,形成染色體外DNA (ecDNA)的SV(複雜結構變異)具有頻繁的高複製數環狀擴增子特徵,例如尿路上皮癌中的大多數 CCND1(G1/S-特異性週期蛋白-D1基因),幷包含額外的DNA片段並導致治療耐藥性的進化。在競爭試驗中,在順鉑或載體對照存在下,共培養等數量的具有GFP標記的空載體和mCherry標記的CCDN1遊離型ecDNA的UMUC1細胞(CCDN1 UMUC1),使用Incucyte®活細胞成像系統測量 mCherry/GFP熒光訊號的比率來監測對化療的適應性。

圖4. 用Incucyte®監測4天的mCherry/GFP細胞比例示意圖(6個小時拍攝一次),以追蹤腫瘤細胞對化療的適應性

圖5. CCND31 UMUC1細胞與對照細胞的比率,化療藥物順鉑的處理組明顯高於對照,說明CCND31 UMUC1細胞對化療有更佳的適應性

Incucyte®有多個熒光通道可以對多種細胞進行追蹤。

這些文章看重了Incucyte®什麼優點呢?

培養箱內可長達數週的連續觀察,最短几分鐘間隔拍攝,減少人力,防止過多操作對細胞的傷害和移動

多個板位,分別獨立設定檢測程式,可以相容各種孔板和培養皿,通量高

具有劃痕,腫瘤球,類器官,趨化,血管生成等多個分析拍攝模組,並配套相應的耗材

高效簡便的模組化軟體設定和資料分析,輸出圖片、影片、生長曲線等多指標多引數;捕捉細胞每個細節,使得結果更加準確

大於100種最佳化過的活細胞專用熒光試劑、耗材及詳盡的Protocol

實驗形式多樣化:定性,兩者結合,協同/競爭實驗,垂釣

文章數大於16000篇,認可度高

只要放好您的細胞,其他交給Incucyte®吧!祝願大家都能用Incucyte®發好文章!

Incucyte®長時程活細成像系統應用文集

掃描二維碼下載文件

-參考文獻-

[1]Spatial proteomics identifies JAKi as treatment for a lethal skin disease | Nature

[2]AKT and EZH2 inhibitors kill TNBCs by hijacking mechanisms of involution | Nature

[3[A prenatal skin atlas reveals immune regulation of human skin morphogenesis | Nature

[4]The interplay of mutagenesis and ecDNA shapes urothelial cancer evolution | Nature

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