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侵襲性真菌病核酸檢測解決方案
一、侵襲性真菌病概述
侵襲性真菌病（invasive fungal diseases，IFD）是指真菌侵入人體（非寄生、過敏），在組織、器官或血液中生長、繁殖，並導致炎症反應及組織損傷的感染性疾病。常見的致病真菌包括、麴黴、肺孢子菌、隱球菌和毛黴等。肺部是IFD最常見的感染部位，在侵襲性肺真菌病中，麴黴、耶氏肺孢子菌、新型隱球菌為常見致病菌。
隨著醫療技術水平的提高，化療、器官移植等免疫低下患者增多，以及廣譜抗生素、糖皮質激素和免疫抑制劑等藥物的廣泛應用，導致IFD發病人數持續增加，且病情多較危重，病死率高，嚴重威脅患者生命（表）。
表 真菌感染疾病負擔[1]
二、IFD診斷難點
IFD診斷困難主要有以下幾方面的因素：
1、該類疾病患者大多有基礎疾病，這些疾病本身可發生肺部累及，若伴發肺部感染容易被原發病掩蓋，且兩者在臨床表現上無特異性，故需在二者間進行鑑別，若無警惕性，易發生誤診、漏診；
2、侵襲性肺部真菌病大多存在混合感染，給診斷帶來較大的困擾；
3、雖然組織病理活檢是診斷IFD的金標準，但IFD患者大多較危重，常合併呼吸衰竭、凝血功能障礙、多器官功能不全等情況，無法耐受有創檢查，且該方法耗時相對較長，存在侷限性；
4、傳統的實驗室檢測方法，如塗片鏡檢、真菌培養、抗原/抗體等檢測方法存在靈敏度低、培養週期長、部分病原體難培養、結果乾擾因素多等諸多不足。此外，在結果判斷上，需要兼顧宿主因素、區分定植、感染、汙染、混合感染等多種因素來綜合考慮，上述問題均為IFD臨床診斷的難點；
5、IFD大多起病兇險，病死率高，故對檢測手段的時效性要求較高，但目前傳統的檢測手段無法滿足臨床診療需求；
6、IFD治療藥物昂貴、週期長、副作用大等，因此對於IFD的診斷要求精準，防止誤診。
國內外指南、共識根據患者的宿主危險因素、臨床特徵、微生物學證據將IFD的診斷分為確診、臨床診斷和擬診。進行分級診斷的意義在於提高臨床醫生對高危患者發生IFD的警惕性，強調儘早診斷、早期啟動抗真菌治療，降低IFD病死率。
三、PCR方法在IFD臨床診斷中的價值
對於IFD的診斷，臨床需要快速、精準的檢測手段，因為它直接關係到患者的轉歸，在改善患者預後方面發揮重要作用，而從目前臨床常用的檢測方法來看，或有創操作，風險大；或週期長，敏感性、特異性差；或費用昂貴及結果解讀困難等問題，無法滿足臨床需求，PCR方法在IFD的診斷中具有一定優勢，其臨床應用價值已經受到廣泛關注。
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PCR方法在IFD診斷中的優勢特點
PCR方法靈敏性、特異性高、檢測週期短；受患者免疫狀態及抗真菌藥物影響因素少，此外，PCR方法可對真菌病原體載量進行檢測，透過研究設定閾值來判斷定植和感染，以及對患者預後進行評價。
圖 透過設定PCR閾值可以輔助判斷肺孢子菌的定植和感染[2]
圖 PCR陽性閾值的設定能夠輔助判斷侵襲性肺麴黴病患者預後[3]
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國內外相關指南/共識對PCR的定位
歐洲癌症研究和治療組織/侵襲性真菌感染協作組（ EORTC/MSGERC）侵襲性真菌病共識（2019）、美國胸科協會肺部及重症監護真菌感染實驗室檢測臨床實踐指南、血液病/惡性腫瘤患者侵襲性真菌病的診斷標準與治療原則（第六次修訂版）、侵襲性真菌病實驗室診斷方法臨床應用專家共識、侵襲性真菌病真菌學檢查指南、重症新型冠狀病毒感染合併侵襲性肺麴黴病和肺毛黴病診治專家共識等國內外指南 共識均肯定了PCR方法學價值，提出PCR方法具有較好的敏感度和特異性，可作為IFD診斷的重要微生物學證據，在IFD的診斷中有較好的應用 前景。
表 各指南/共識對於PCR方法的建議或表述
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PCR方法聯合其它方法學檢測的意義
當然，目前困擾臨床醫生的另一個主要問題，就是真菌定植與感染的鑑別，活檢組織及無菌體液標本的檢測結果可作為確診依據，而非無菌體液的檢測結果則需考慮定植感染的鑑別問題，故針對該問題的解決，更多的需要醫生結合患者宿主因素及多種檢測結果綜合判斷，在2017年 歐洲臨床微生物學和感染病學會（ ESCMID ） - 歐洲醫學真菌學聯盟（ ECMM ） - 歐洲呼吸學會（ ERS ） 麴黴病診斷和管理指南、2019版EORTC/MSGERC侵襲性真菌病指南及其增刊中，均推薦PCR方法與G試驗、GM試驗聯合檢測，有助於區分定植和感染，顯著提升IFD診斷的特異性 [10-12] 。
綜述所述，PCR方法能夠在IFD的早期診斷中發揮重要作用，其臨床價值已逐步得到認可，具有廣泛的應用前景，透過與多種檢測方法的聯合應用，可解決IFD的臨床痛點，滿足臨床需求。
卓誠惠生侵襲性真菌病核酸檢測解決方案
目前卓誠惠生侵襲性真菌病核酸檢測解決方案可精準檢出致病菌病原體，用於早期常見真菌菌屬分型診斷、快速提供準確的檢測報告、指導侵襲性真菌病精準治療，滿足臨床侵襲性真菌檢測的需求。
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麴黴菌屬、新型隱球菌及耶氏肺孢子菌核酸檢測試劑盒（PCR熒光探針法）
用於定性檢測痰液樣本中（ 如免疫低下或缺陷人群）的麴黴菌屬、新型隱球菌和耶氏肺孢子菌的核酸，開啟真菌精準檢測新時代。
特點：
1.精準檢出疑似致病真菌病原體
2.早期常見真菌菌屬分型診斷
3.快速提供準確的檢測報告
4 .助力 定植和致病菌區分
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麴黴菌屬核酸檢測試劑盒（PCR熒光探針法）
用於體外定性檢測人痰液樣本中的麴黴菌屬的核酸DNA，用於麴黴菌屬感染的輔助的診斷和管理。
特點：
1.聚焦肺真菌病主要致病菌
2.助力於肺麴黴病早期診斷
3.提供快速準確的檢測報告
4.指導肺麴黴病精準治療
關於卓誠惠生：
北京卓誠惠生生物科技股份有限公司成立於2010年，是專注於提供感染性疾病診斷整體解決方案的國家高新技術企業。公司基於多重PCR技術平臺，開發了500餘種診斷試劑，獲得醫療器械註冊證、備案證20餘項。業務領域包括公共衛生、臨床診斷、第三方實驗室及家庭自測領域。卓誠惠生秉承“讓診斷更有價值”的使命，致力於成為值得信賴的感染性疾病診斷專家型企業。
參考文獻：
[1]Felix Bongo min, Sara Gago, Rita O Oladele, et al. Global and Multi-National Prevalence of Fungal Diseases-Estimate Precision. J Fungi (Basel). 2017,18;3(4):57.
[2]Cristina Veintimilla, Ana Álvarez-Uría, Pablo Martín-Rabadán, et al. Pneumocystis jirovecii Pneumonia Diagnostic Approach: Real-Life Experience in a Tertiary Centre. J Fungi (Basel). 2023 Mar 28;9(4):414.
[3]Hanne Lamberink, Alex Wagemakers, Kim C E Sigaloff, et al. The impact of the updated EORTC/MSG criteria on the classification of hematological patients with suspected invasive pulmonary aspergillosis. Clin Microbiol Infect. 2022,28(8):1120-1125.
[4]J Peter Donnelly, Sharon C Chen, Carol A Kauffman, et al. Revision and Update of the Consensus Definitions of Invasive Fungal Disease From the European Organization for Research and Treatment of Cancer and the Mycoses Study Group Education and Research Consortium. Clin Infect Dis. 2020,71(6):1367-1376.
[5]Chadi A Hage, Eva M Carmona, Oleg Epelbaum，et al. Microbiological Laboratory Testing in the Diagnosis of Fungal Infections in Pulmonary and Critical Care Practice. An Official American Thoracic Society Clinical Practice Guideline. Am J Respir Crit Care Med 2019,200(5):535-550.
[6]血液病/惡性腫瘤患者侵襲性真菌病的診斷標準與治療原則(第六次修訂版). 中華內科雜誌，2020,59(10):754-762.
[7]侵襲性真菌病實驗室診斷方法臨床應用專家共識. 中華內科雜誌,2022,61(2):134-141.
[8]侵襲性真菌病真菌學檢查指南. 中華檢驗醫學雜誌,2023,46(6):541-557.
[9]重症新型冠狀病毒感染合併侵襲性肺麴黴病和肺毛黴病診治專家共識. 中華結核和呼吸雜誌, 2024,47(1):10-23.
[10]A J Ullmann , J M Aguado , S Arikan-Akdagli, et al. Diagnosis and management of Aspergillus diseases: executive summary of the 2017 ESCMID-ECMM-ERS guideline. Clin Microbiol Infect. 2018,Suppl 1:e1-e38.
[11]Katrien Lagrou , Sharon Chen , Henry Masur, et al. Pneumocystis jirovecii Disease: Basis for the Revised EORTC/MSGERC Invasive Fungal Disease Definitions in Individuals Without Human Immunodeficiency Virus. Clin Infect Dis. 2021,72(Suppl 2):S114-S120.
[12]P Lewis White , Stephane Bretagne , Angela M Caliendo, et al. Aspergillus Polymerase Chain Reaction-An Update on Technical Recommendations, Clinical Applications, and Justification for Inclusion in the Second Revision of the EORTC/MSGERC Definitions of Invasive Fungal Disease. Clin Infect Dis. 2021 Mar 12;72(Suppl 2):S95-S101.
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